SAMMENDRAG OG FORKLARING TESTEN
Leptospirose forekommer over hele verden og er et vanlig mildt til alvorlig helseproblem for mennesker og dyr, spesielt i områder med varmt og fuktig klima.De naturlige reservoarene for leptospirose er gnagere så vel som et stort utvalg av tamme pattedyr.Menneskelig infeksjon er forårsaket av L. interrogans, det patogene medlemmet av slekten Leptospira.Infeksjonen spres via urin fra vertsdyret.
Etter infeksjon er leptospirer tilstede i blodet til de er fjernet etter 4 til 7 dager etter produksjon av anti-L.interrogans-antistoffer, først av IgM-klassen.Dyrking av blod, urin og cerebrospinalvæske er et effektivt middel for å bekrefte diagnosen i løpet av 1. til 2. uke etter eksponering.Serologisk påvisning av antiL.interrogans antistoffer er også en vanlig diagnostisk metode.Tester er tilgjengelige under denne kategorien: 1) Den mikroskopiske agglutinasjonstesten (MAT);2) ELISA;3) Indirekte fluorescerende antistofftester (IFAT).Imidlertid krever alle ovennevnte metoder et sofistikert anlegg og godt trente teknikere.
Leptospira IgG/IgM er en enkel serologisk test som bruker antigener fra L. interrogans og oppdager IgG- og IgM-antistoffer mot disse mikroorganismene samtidig.Testen kan utføres av utrent eller minimalt dyktig personell, uten tungvint laboratorieutstyr og resultatet er tilgjengelig innen 15 minutter.
PRINSIPP
Leptospira IgG/IgM Rapid Test Kit er en lateral flow-kromatografi
immunoassay.Testkassetten består av: 1) en burgunderfarget konjugatpute som inneholder rekombinante L. interrogans-antigener konjugert med kolloid gull (Leptospira-konjugater) og kanin-IgG-gullkonjugater, 2) en nitrocellulosemembranstrimmel som inneholder to testbånd (M- og G-bånd) og et kontrollbånd (C-bånd).M-båndet er forhåndsbelagt med monoklonalt anti-humant IgM for påvisning av anti-L.. interrogans IgM, G-bånd er forhåndsbelagt med reagenser for påvisning av anti-L.interrogans IgG, og C-båndet er pre-belagt med geit anti-kanin IgG.
Når et tilstrekkelig volum av testprøven dispenseres inn i prøvebrønnen på kassetten, migrerer prøven ved kapillærvirkning over kassetten.IgM anti-L.. interrogans hvis de finnes i prøven vil binde seg til Leptospira-konjugatene.Immunkomplekset fanges deretter på membranen av det forhåndsbelagte anti-humane IgM-antistoffet, og danner et burgunderfarget M-bånd, som indikerer et L.. interrogans IgM-positivt testresultat.IgG anti-L.. interrogans hvis de er tilstede i prøven vil binde seg til Leptospira-konjugatene.Immunkomplekset fanges deretter opp av de forhåndsbelagte reagensene på membranen, og danner et burgunderfarget G-bånd, noe som indikerer et L.. interrogans IgG-positivt testresultat.
Fravær av testbånd (M og G) antyder et negativt resultat.Testen inneholder en intern kontroll (C-bånd) som skal vise et burgunderfarget bånd av immunkomplekset til geit-anti-kanin-IgG/kanin-IgG-gullkonjugat uavhengig av fargeutviklingen på noen av testbåndene.Ellers er testresultatet ugyldig og prøven må testes på nytt med en annen enhet.
